pcr仪-南京精塞玛仪器-实时荧光定量pcr仪批发

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    2022-7-30

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pcr反应过程中产生的dna拷贝数是呈指数方式增加的,随着反应循环数的增加,终pcr反应不再以指数方式生成模板,从而进入平台期。在传统的pcr 中,常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测pcr反应的终扩增产物,因此用此终点法对pcr产物定量存在不---之处。在real-time q-pcr中,对整个pcr反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号,pcr仪,随着反应时间的进行,监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲 线。


pcr的三个反应步骤反复进行,使dna扩增量呈指数上升。反应终的dna扩增量可用y=(1+x)n计算。y代表dn---段扩增后的拷贝数,x表示平均每次的扩增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%,实际反应初期,实时荧光定量pcr仪批发,靶序列dn---段的增加呈指数形式,随着pcr产物的逐渐积累,被扩增的dn---段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,pcr扩增仪,使平均效率达不到理论值


taqman荧光探针:pcr扩增时在加入一对引物的同时加入一个特---的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;pcr扩增时,taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,小型pcr仪,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条dna链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与pcr产物形成完全同步。而新型taqman-mgb探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(snp),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。


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