pcr反应过程中产生的dna拷贝数是呈指数方式增加的，随着反应循环数的增加，终pcr反应不再以指数方式生成模板，从而进入平台期。在传统的pcr 中，常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测pcr反应的终扩增产物，因此用此终点法对pcr产物定量存在不---之处。在real-time q-pcr中，对整个pcr反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲 线。
我们上面提到了反应的原理，由此我们可以简单的推断：温度作为变性-复性-延伸的基本设置，这个是我们需要校准的一个项目。
那么在反应的过程中，pcr仪，温度示值与设定值是否准确，我们需要知道。这是个温度示值误差；因为我们需要升温，降温，升温，这是不是涉及到一个速率的问题，pcr仪厂家，升降温的快慢，pcr扩增仪，会直接影响到整个反应过程，所以，升降温速率也是我们需要考量的一个方向。仪器通过加热模块去控制温度，在快速升降温的过程中，仪器不可避免的会先升高/降低温度之后，再达到所设定的问题，这就是温度的过冲，这也是可能也是一个考量的指标。达到一定的温度之后，仪器要平衡一段时间（所设定的时间），而温度平衡的时间和设置的时间，是否一致，也是要考虑的一个方向。不同的dna模板，需要的温度和解链的时间不一样，如果解链的时间没达到要求，荧光定量pcr仪价格，dna没有完全变性，在降温复性的过程中，会恢复到天然的状态。
pcr的早设想 ---研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，korana于1971年早提出---体外扩增的设想：“经过dna变性，与合适的引物杂交，用dna聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可trna基因”。
pcr的实现
1985年美国pe-cetus公司人类遗传研究室的mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于dna的体内，只是在试管中给dna的体外合成提供以致一种合适的条件－－-摸板dna ，寡核苷酸引物，dna聚合酶，合适的缓冲体系，dna变性、复性及延伸的温度与时间。
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