pcr的早设想 ---研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，korana于1971年早提出---体外扩增的设想：“经过dna变性，与合适的引物杂交，用dna聚合酶延伸引物，pcr仪批发，并不断重复该过程便可trna基因”。
pcr的实现
1985年美国pe-cetus公司人类遗传研究室的mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于dna的体内，只是在试管中给dna的体外合成提供以致一种合适的条件－－-摸板dna ，寡核苷酸引物，dna聚合酶，进口pcr仪，合适的缓冲体系，dna变性、复性及延伸的温度与时间。
在pcr反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生进入指数期、线性期和终的平台期，pcr仪报价，因此可以在pcr反应处于指数期的某一点 上来检测pcr产物的量，并且由此来推断模板初的含量。为了便于对所检测样本进行比较，pcr仪，在real-time q-pcr反应的指数期，首先需设定一定荧光信号的域值，一般这个域值（threshold）是以pcr反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号 （baseline），荧光域值的缺省设置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。
在普通pcr仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统的pcr仪称作荧光定量pcr仪。其pcr扩增原理和普通pcr仪扩增原理相同，只是pcr扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记，使用引物和荧光探针同时与模板特---结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这种pcr仪叫做实时荧光定量pcr仪（qpcr仪）。荧光定量pcr仪有单通道、双通道和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候，选用单通道，有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物，因为一次只能检测一种目的基因的扩增量，需多次扩增才能检测完不同目的基因片段的量。主要用于医学---检测、生物研发、食品行业、科研院校等机构。
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